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大小鼠自体血注射脑出血模型

人阅读 发布时间:2023-11-23 16:20

一、技术简介:
1. 疾病概述:
脑出血是指非外伤性脑实质内血管破裂引起的出血,占全部脑卒中的20%~30%,急性期病死率为30%~40%。发生的原因主要与脑血管的病变有关,即与高血脂、糖尿病、高血压、血管的老化、吸烟等密切相关。脑出血的患者往往由于情绪激动、费劲用力时突然发病,早期死亡率很高,幸存者中多数留有不同程度的运动障碍、认知障碍、言语吞咽障碍等后遗症。
2. 模型建立:
2.1 实验动物
健康成年Wistar大鼠,体重(250-300)g
1.2 实验器材
脑立体定位仪,电子秤,50uL、100uL微量注射器,微电钻,理发器,手术器械(手术刀、止血钳、手术剪、持针器等),显微器械(显微钳、显微镊、显微剪等)。
麻醉药:水合氯醛。
1.3分组方法
根据注血方法的不同将大鼠随机分成2组,每组各30只。对照组采取单次注血法:实验组采取两次注血法。
1.4 手术方法
对照组:术前未禁饮禁食分别称重,用灭菌空针按300mg/kg抽取10%水合氯醛,备用。抓取大鼠,一手固定大鼠双侧前腿根部,一脚固定大鼠尾巴常规消毒右腹股沟区后,于腹股沟内侧1cm~1.5cm处进针,回抽无血液及其它液体后,注射麻醉药物。等待约5min~10min,麻醉生效后,将大鼠俯卧置于专用立体定位仪手术台上,固定头部调节门齿托的高度,保持呼吸道通畅使大鼠的前后囱处于同一水平。再次于右腹股沟区用理发器剪除毛发,常规消毒,切开约1cm,钝性分离腹股沟区组织,找到股动脉抽0.5mL动脉血,并轻轻摇匀用100uL微量注射器抽取50uL,备用。切口处1号线间断缝合,并再次消毒。用理发发器剪除头顶部毛发后,常规消毒,在中线处作1c m左右直切口,分离皮肤及皮下组织,暴露前囟点,取前囟点右侧中线旁开3mm、前囟前1m m,用自制微钻头电钻钻孔,钻透颅骨硬脑膜处,停止钻孔,骨孔大小约1.5mm,用备好血的微量注射器从钻好的骨孔垂直进针,深度距颅骨表面5.5mm,匀速缓慢注入50uL,停留10min后,缓慢退出微量注射器。用骨腊封闭骨孔,间断缝合皮肤。实验组:首先注入20uL停留5mir后,再缓慢注入30uL,停留5min后,再缓慢退出微量注射器。余操作同对照组。

3. 观察指标
待大鼠清醒后进行行为学观察,采用Longa评分法评价,0分神经系统功能无缺损;1分:左前侧肢体不能完全伸直;2分:在大鼠行走时出现转圈的现象;3分:在大鼠行走时,出现瘫痪侧肢体的倾倒;4分:不能自行行走,出现意识丧失的情况。本实验1~3分视为模型制作成功。
二、服务流程:
1. 客户提供需要造模的实验动物,或者委托公司代为处理。
2. 客户获得动物模型或病理组织进行检测分析,或者委托公司代为处理。
三、结果形式:
1. 动物造模与检测分析的报告以及原始数据
2. 实验周期:5个工作日

 

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