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技术资料/正文
结直肠癌造模方法
193 人阅读发布时间：2023-10-20 13:26
结直肠癌（colorectal cancer）是消化系统常见的恶性肿瘤之一，其淋巴道转移率较高。目前主要的动物模型有自发性模型，诱发性模型，移植性模型以及转基因型模型，其中后三者模型在目前的实验研究中已得到广泛应用。据研究，动物结直肠癌的自然发病率非常低，仅田鼠较易发生肿瘤。实验常选用的动物有小鼠、大鼠及豚鼠等。目前最常用的是诱发性模型，其中常使用的致癌剂主要是间接致癌剂二甲肼及直接致癌剂亚硝胺类。目前，用于结直肠癌动物模型建模的方法主要有 2 种：结直肠癌动物模型和结直肠癌肝转移动物模型。
结直肠癌动物模型的基本原理是通过长期注射致癌剂诱导大肠癌变，建立大肠癌模型。
AOM/DSS模型是目前使用最广泛的UC化学诱导模型，临床症状学、形态学及病理学观察证明，该模型与人类溃疡性结肠炎癌变过程极为相似。AOM引起鸟嘌呤O6甲基化是诱导基因突变损伤最主要的原因，基因突变使细胞过度增殖，形成特异性的大肠肿瘤。DSS的致炎机制尚未阐明，可能与DSS的负电荷影响 DNA 合成、抑制上皮细胞增生、破坏肠黏膜屏障、导致巨噬细胞功能障碍及肠道菌群失调有关。
实验动物
BALB/c小鼠（7周龄，雄性）
实验材料
DSS(Yeasen#60316ES,MW36000-50000)、AOM
实验前准备
DSS配制：使用无菌水配制浓度1-3% DSS溶液，储存在4℃备用。
AOM配制：用无菌水溶解AOM配制10 mg/mL的储存液，分装后放到-20℃保存，避免反复冻融。使用之前，融化分装母液并用无菌生理盐水1:10倍稀释。
实验步骤
1.第1天称重并标记小鼠，实验组小鼠腹腔注射偶氮甲烷 AOM（10 mg/kg）；2.用常规饮用水喂食一周；3.用2.5%浓度DSS替换饮用水喂食一周；4.用常规饮用水喂食2周；5.步骤3和步骤4重复3次。
2.AOM/DSS结直肠癌造模步骤
结果分析
3.(A)AOM/DSS 诱导的结直肠癌示意图， (B)小鼠体重、(C)腹泻评分、(D)出血评分和(E) 代表性全结肠和结肠癌数的变化。
4.结直肠癌切片HE染色结果
结直肠癌动物模型的基本原理是通过长期注射致癌剂诱导大肠癌变，建立大肠癌模型。
AOM/DSS模型是目前使用最广泛的UC化学诱导模型，临床症状学、形态学及病理学观察证明，该模型与人类溃疡性结肠炎癌变过程极为相似。AOM引起鸟嘌呤O6甲基化是诱导基因突变损伤最主要的原因，基因突变使细胞过度增殖，形成特异性的大肠肿瘤。DSS的致炎机制尚未阐明，可能与DSS的负电荷影响 DNA 合成、抑制上皮细胞增生、破坏肠黏膜屏障、导致巨噬细胞功能障碍及肠道菌群失调有关。
实验动物
BALB/c小鼠（7周龄，雄性）
实验材料
DSS(Yeasen#60316ES,MW36000-50000)、AOM
实验前准备
DSS配制：使用无菌水配制浓度1-3% DSS溶液，储存在4℃备用。
AOM配制：用无菌水溶解AOM配制10 mg/mL的储存液，分装后放到-20℃保存，避免反复冻融。使用之前，融化分装母液并用无菌生理盐水1:10倍稀释。
实验步骤
1.第1天称重并标记小鼠，实验组小鼠腹腔注射偶氮甲烷 AOM（10 mg/kg）；2.用常规饮用水喂食一周；3.用2.5%浓度DSS替换饮用水喂食一周；4.用常规饮用水喂食2周；5.步骤3和步骤4重复3次。
2.AOM/DSS结直肠癌造模步骤
结果分析
3.(A)AOM/DSS 诱导的结直肠癌示意图， (B)小鼠体重、(C)腹泻评分、(D)出血评分和(E) 代表性全结肠和结肠癌数的变化。
4.结直肠癌切片HE染色结果